Розповсюдження карантинних патогенів становить значний ризик для глобального рослинництва, загрожуючи здоров’ю врожаю та порушуючи агроекосистеми. Своєчасне й точне-виявлення на місці має вирішальне значення для запобігання спалахів. Рекомбіназна полімеразна ампліфікація (RPA) і багатокомпонентний DNAzyme (MNAzyme) є перспективними технологіями ізотермічної детекції; однак їх інтеграції перешкоджає потреба в одноланцюговій ДНК (ssDNA) для активації MNAzyme, оскільки RPA генерує дволанцюгову ДНК (dsDNA). Щоб вирішити цю проблему, ми розробили біосенсор OAR-MNA, інноваційну-горщикову платформу, що поєднує асиметричний RPA (aRPA) з MNAzyme-допоміжною цільовою переробкою. Біосенсор був застосований для виявлення Acidovorax citrulli, збудника бактеріальної плямистості плодів (BFB) у гарбуза. Регулюючи концентрацію праймерів RPA, aRPA генерує велику кількість оцДНК, що дозволяє візуально виявляти A. citrulli з межею виявлення 20 копій/мкл і ідеальною специфічністю, перевершуючи продуктивність флуоресцентного RPA. Біосенсор продемонстрував 100% узгодженість із КПЦР у зразках насіння та зберіг надійну роботу в гомогенаті дині з колосами. Наш порівняльний аналіз виявив переваги системи OAR-MNA, включаючи зниження витрат на виявлення та покращену польову застосовність. У поєднанні з портативним аналізатором ДНК біосенсор забезпечує-зручні результати (+/−), що робить його ідеальним для-розгортання на місці. За межами BFB
виявлення, OAR-MNA було успішно застосовано для виявлення вірусу зеленої мозаїки огірка (CGMMV), РНК-карантинного збудника, який завдає серйозних збитків урожаю гарбузів. Забезпечуючи ранню точну-діагностику на місці, біосенсор OAR-MNA являє собою прогрес у технології виявлення патогенів рослин, пропонуючи багатообіцяючий інструмент для захисту глобального виробництва сільськогосподарських культур.
